血清铜蓝蛋白在乙肝肝硬化及肝癌中的检测意义与无创肝纤维化肝硬化早期检测诊断方法

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[摘要]目的研究乙肝肝硬化及乙肝相关性肝癌（以下简称肝癌）患者血清铜蓝蛋白（C_P)含量变化，探讨 C_P在肝癌发生中的作用。方法选取符合纳排标准的乙肝肝硬化组患者60例、肝癌组患者90例,另选取同期健 康体检者30例作为对照组。采用免疫散射比浊法测定各组患者C_P含量，比较各组水平的差异。结果乙肝肝硬 化组、肝癌组患者C_P水平与对照组间比较差异有统计学意义（f = 53.620，P < 0.05);肝癌组与肝硬化代偿期组比 较，早期肝癌组C_P水平差异无统计学意义，中、晚期组C_P水平显著升高差异具有统计学意义（P <0.05);肝癌组 与肝硬化失代偿期组比较，早、中、晚期肝癌组C_P水平均显著升髙差异具有统计学意义（P <0.05),且C_P含量随 着临床分期的增髙而升高。Cp、甲胎蛋白（AFP)单独诊断R0C曲线下面积分别为(0• 788、0. 799)差异有统计学意 义(/><0.05),Cp联合AFP诊断R0C曲线下面积增大为0.848(P<0.05)。结论血清C_P水平的升高可能与肝 癌病情发展相关，C_P可作为肝病诊断的重要参考指标,对判断肝癌患者诊断、疗效及预后具有潜在的价值。

[关键词]血清铜蓝蛋白；乙肝肝硬化；乙.肝相关性肝癌 [中图分类号]R742.4 [文献标识码]A

铜蓝蛋白（Cp)是一种含铜具有氧化酶的a2球 蛋白，血清中约有95%铜与_a2球蛋白结合成铜蓝蛋 白Cp具有铜离子运输，铁离子平衡、转运，血液 凝固、血管生成以及抗氧化作用等多种生物活 性^[2_3]。Cp作为一种急性期反应蛋白，在肝脏合

成,当肝脏受损时Cp水平将发生改变。近年来有研 究发现^[4_^5]，许多恶性肿瘤患者血清中铜蓝蛋白升 高，尤其是原发性肝癌。因此,C_P作为非特异性肿 瘤标记物运用于恶性肿瘤的临床协助诊断越来越受 到重视。本文通过对乙肝肝硬化及肝癌患者血清 Cp、甲胎蛋白（AFP)检测，分析在乙肝肝硬化及肝癌 检测Cp水平变化可能的意义，探讨其对判断慢性肝 病及肝癌诊断及预后的作用,现报告如下。

i资料与方法

1.1 一般资料:选择2015年5月-2017年6月在 宁夏医科大学总医院感染疾病科门诊及住院治疗的 150例乙肝相关性肝病患者为研究对象，其中乙肝肝 硬化(无肝癌）患者60例，分为代偿期组30例（男 19例，女11例），平均年龄(50. 1 ± 13. 6)岁；失代偿 组30例（男18例，女12例），平均年龄（51. 2 ± 13. 8)岁。乙肝相关性肝癌患者根据巴塞罗那分期 标准再分为：乙肝相关早期肝癌组30例，其中男20 例，女10例，平均年龄(49.2 ± 15. 5)岁；乙肝相关中 期肝癌组30例（男19例，女11例），平均年龄 (50. 2 ± 16.1)岁；乙肝相关晚期肝癌组患者30例 (男20例，女10例），平均年龄(51.0 ±15.9)岁。30 例同期健康体检者作为健康对照组,其中男18例， 女12例，平均年龄（45. 9 ±16. 2)岁。人选标准： ①乙肝肝硬化患者均符合2015年中华医学会肝病 学分会及中华医学会感染病学分会联合修订的《慢 性乙型肝炎防治指南》中关于慢性乙型肝炎肝硬化 诊断及分期标准^[6]。②肝癌患者诊断依据第4届全 国肝癌学术大会讨论通过的原发性肝癌诊断标 准^[7]，肝癌的分期采用临床常用的巴塞罗那（BCLC) 肝癌分期系统。③排除肝豆状核变性、营养性铜缺 乏、Menks病及肝肾综合征等可能导致血清铜蓝蛋 白水平减低的因素及同时合并其他感染（如呼吸道 感染、腹腔感染等）、妊娠、口服避孕药可能导致体内 Cp升高的患者;排除免疫性肝病患者以及酒精、药 物、化学、中毒等因素引起肝脏功能损害的患者;排 除HBV感染相关性肝癌以外的其他恶性肿瘤。同 期30例健康体检者各项肝炎病毒检测结果均为阴 性，肝功能等相关检测结果均为正常水平。

1.2血清指标检查：利用免疫散射比浊法对Cp进 行检测（采用德国西门子公司的BNII型全自动血浆 特种蛋白分析仪，试剂为配套试剂）。严格按公司试剂盒及仪器使用说明书进行 操作。

1.3统计学方法:采用SPSS 19.0统计软件进行数 据分析，计量资料以* ±s表示，应用方差分析比较 组间差异,P<〇.〇5为差异有统计学意义。

2 结果

2.1各组人群血清Cp水平比较：乙肝肝硬化组代 偿期及失代偿期组患者血清Cp水平，分别为 (0.219± 0.024)g/L、（0. 181 ±0.026)g/L;乙肝相关 性肝癌组早期、中期、晚期组患者血清Cp水平，分别 S(0.210± 0.038)g/L、（0.312± 0. 092)g/L、 (0• 386 ± 0. 076) g/L;对照组患者血清Cp水平为

(0.249 ± 0.032)g/L。6组患者比较差异有统计学意 义（f = 53.620，P < 0_ 05 )。①与对照组相比，乙肝肝 硬化各组及乙肝相关性肝癌各组患者血清Cp水平变 化差异有统计学意义(P < 〇. 05);②与对照组相比，乙 肝肝硬化组代偿期及失代偿期组患者血清Cp水平差 异有统计学意义(P < 〇. 05 )，且随着肝硬化由代偿期 到失代偿期发展，患者血清Cp水平呈下降趋势，肝硬 化各组间差异有统计学意义(P < 〇. 05);③与对照组 相比，乙肝相关性肝癌组早期患者血清Cp水平显著 降低(P<0.05)，中期、晚期患者血清C_P水平显著升 高(/><0.05)，且随着肝癌由早期、中期到晚期发展， 其水平反呈上升趋势，肝癌各组间差异有统计学意义 (/><0_ 05);④乙肝相关性肝癌各组与乙肝肝硬化代 偿期组比较,乙肝相关性肝癌早期组血清Cp水平差 异无统计学意义，中期、晚期组血清Cp水平显著升高 (尸<0.05);⑤乙肝相关性肝癌各组与乙肝肝硬化失 代偿期组比较，早期、中期、晚期组C_P水平均显著升 高，且其水平随着临床分期的增高而逐渐升高，4组间 两两比较差异均具有统计学意义（F = 53.620，P< 〇.〇5)，见表 1。

表1各组患者血清C_P的水平比较（g/L)

组别

乙肝肝硬化组
代偿期	30	0.219 ±0.024
失代偿期	30	0.181 ±0.026
乙肝相关性肝癌组
早期	30	0.210 ±0.038
中期	30	0.312 ±0.092
晚期	30	0.386 ±0.076
对照组	30	0.249 ±0.032

2.2血清Cp水平与原发性肝癌BCLC分期（早期、 中期、晚期）相关性比较:肝癌患者血清Cp水平随着 临床BCLC分期的增高而增高，血清Cp水平与乙肝 相关性肝癌BCLC分期（早期、中期、晚期）呈正相关 性（r=0_710，P<0.05)。

2.3 Cp、AFP单独检测及联合检测乙肝相关性肝 癌:单独检测肝癌Cp的AUC为0• 788,95% C/为 0• 711 ~ 0. 865; AFP 的 AUC 为 0. 799,95% C/ 为 0.780 ~0. 915; Cp、AFP联合检测诊断肝癌的AUC 为0.848，95% C/为0.725 ~ 0.874,均具有诊断意义 (^<0.05),见表 2。

表2血清C_P和AFP单项及联合诊断乙肝 相关性肝癌R0C曲线下面积及相关性指标

检验变量	曲线下面积	S.E	95% Cf	p值
Cp	0.788	0.039	0.711-0.865	<0.05
AFP	0.799	0.034	0.780-0.915	<0.05
联合检测	0.848	0.038	0.725 〜0.874	<0.05

宁夏医学杂志20丨8年2月第40卷第2期NingxiaMed J.Feh.2018,Vol40,N_〇.2

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3讨论

Cp又名铜氧化酶，是一种含铜的C(2糖蛋白，是 细胞色素氧化酶的组分，其生理功能包括参与铜转 运、铁代谢、抗氧化剂参与急性期反应^[8]。Cp属于 一种急性期反应蛋白，在机体处于感染、创伤或肿瘤 状态时可诱发肝内Cp基因表达上调，从而Cp水平 升高&¹°^]。国内外研究表明^[1°~"^]，肝功能受损，尤 其是肝衰竭时Cp 7JC平可发生不同程度下降;慢性乙 型肝炎患者的血清Cp明显高于健康人和肝衰竭患 者,可能与Cp是一种急相性反应蛋白^[12]和慢性乙 型肝炎的活动有关。本研究结果与其相一致。

目前，肝硬化时Cp的变化结论不一，但少量文 献报道肝硬化时Cp含量无明显变化。郑永平等^[13] 认为,Cp在Child - PughA级时血清浓度较健康组 髙，在Child—PughB、C级时反而表现出下降趋势， 也就是肝损伤较轻时C_P相对于对照组来说是升高 的，肝损伤严重时则逐渐下降。本实验结果表明，肝 硬化组患者血清C_P水平较对照组显著降低（/> < 〇.〇5)，且随着肝硬化由代偿期到失代偿期发展，血 清Cp水平会进一步降低，各期之间相比差异有统计 学意义(P <0. 05)，这提示C_P可能与乙肝肝硬化疾 病的发生、发展有关。肝硬化时血清C_P水平降低的 原因可能为：血清Cp是一种具有催化功能的蛋白 质，由于肝硬化时肝实质细胞反复受损，大量肝细胞 坏死，肝细胞数量减少，使得肝脏合成蛋白的功能下 降，因此C_P值降低，而且病情越重降低越明显，即失 代偿期较代偿期Cp水平降低更显著。

进一步研究表明^[14] ,C_P可作为肿瘤标记物，尤 其是消化系统肿瘤;康华等人^[15]发现原发性肝癌患 者Cp表达水平显著增加，原因是Cp具有AFP特 性，肝细胞发生恶性变化时，细胞的癌基因被启动， 使肝细胞合成Cp的能力增强，以致其含量在肝癌患 者体内明显增高。本研究发现肝癌组患者血清Cp 含量较健康组显著升高（P <〇. 05),这与国内大多 数研究结果一致，且本实验进一步研究结果发现，随 着肝癌BCLC分级由早期到中期再到晚期发展，血 清Cp水平会进一步升高，各期之间相比差异有统计 学意义(P <〇.〇5)，血清Cp水平与肝癌巴塞罗那分 级存呈正相关性，这提示Cp可能参与乙肝相关性肝 癌疾病的发生、发展。本文对150例患者采用 &回归方式，建立了 C_P、AFP联合预测因子，显示 Cp、AFP单独诊断ROC曲线下面积分别为0. 788、 0• 799，均具有诊断意义（P < 0• 05); Cp、AFP联合诊 断ROC曲线下面积是0.848,具有诊断意义（P< 0.05)。髙国生等研究显示，AFP、Cp、触珠蛋白

(HP)联合诊断ROC曲线下面积为0• 844,与本研究 结果相似，提示Cp和AFP对乙肝相关性肝癌的诊断 具有较高的临床应用价值，应给予高度重视，这与康 华等^[15]研究一致。肝癌患者体内Cp水平升高的原 因可能还与以下几个方面有关:①肝癌肿瘤使胆管 受到压迫，肝中合成的Cp从胆汁中排出受阻返流人 血。②当肿瘤组织发生感染、出血或坏死时会增强 应激反应，使C_P含量升高。③肝细胞癌基因被激 活，致肝细胞合成C_P的能力增强。④肿瘤刺激IL -6大量分泌，通过肾上腺皮质激素作用于肝细胞 膜，再通过CAMP增加，肝脏合成C_P亦增加。⑤Cp 降解功能紊乱，恶性肿瘤增殖活跃、癌细胞表面糖脂 脱落增加，使血液唾液酸含量异常增加;但癌症患者 唾液酸酶活性降低、唾液酸转移酶活性增高，使脱去 唾液酸处于分解状态的Cp又被重新唾液酸化，影响 C_P的正常降解过程，导致Cp水平升高^[16]。

另外,临床上肝硬化与早期肝癌患者血清AFP 均有不同程度的升高，因此进行两者诊断及鉴别诊 断具有一定的难度。本研究结果显示，乙肝肝硬化 患者血清C_P水平显著降低，而乙肝相关性肝癌患者 其水平显著升高，因此临床上可根据C_P这一特点进 行肝癌的筛以及肝硬化与肝癌的鉴别，进而通过 Cp辅助诊断提高诊断率，此项研究具有临床意义。 但基于本实验的样本量限制，Cp对早期肝癌的诊断 价值仍需要进一步研究。

成都华西华科研究所研发生产无创肝纤维化肝硬化早期检测诊断仪

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