乙肝患者血清肝纤维化检测与肝穿病理结果的 相关性与无创肝纤维化肝硬化早期检测诊断方法

I摘要】目的成都华西华科研究所研究分析乙型肝炎（乙肝）患者肝纤维化血清指标与肝穿病理诊断结果的相关性和临床价值。方法 收集162例接受过肝穿病理诊断的乙肝肝纤维化患者血清，检测其血清透明质酸（HA)、I型前肢原（PmP)、IV型 胶原（IV-C)、粘连蛋白（LN),同时选取50例体检中心体检健康者为正常对照组。结果162例乙肝肝纤维化患者血 清11入、？皿？、1¥-(：、1^与病理分期、分级均呈正相关性（^=30.616，/^}<0.01),并且与病理分期的正相关关系比分 级明显。肝组织学纤维化不同分期、分级间与HA、P1EP、]V-C、LN等血清纤维化指标检测结果显示，随着肝纤维化程 度加重，其值逐靳升高，其各项指标差异均有统计学意义（户<0.05或<0.01)。结论血清肝纤维化指标HA、Pffl P、IV-C、LN检测，对于肝纤维早期诊断及判断预后有良好的应用价值。

【关键词】血清;肝纤维化指标;肝病理;肝炎，乙型

肝纤维化是乙型肝炎（乙肝）过渡到肝硬化之间 的最重要的组织学改变，如何建立无创伤性检测，为临 床早期诊断肝硬化提供依据，是医学界关注的焦点。 本研究对162例接受过肝活组织检查的乙肝患者，进 行血清肝纤维化指标透明质酸（ha)、m型前胶原（P DIP)、IV型胶原（IV-C)、粘连蛋白（LN)检测与组织学 对比性研究，分析肝穿病理分期、分级与血清中肝纤 维化指标之间的相关性，为临床上早期诊断肝硬化提 供无创伤性检测平台。

1资料与方法

1.1 一般资料选择2010年12月至2013年12月 在中国人民解放军第371中心医院和新乡市传染病医 院住院的162例患者，男82例，女80例;年龄20 ~ 60 岁，平均年龄(48 ±8)岁。受检对象均于肝穿前1.周 内抽取清晨空腹静脉血5 ml,-20尤保存，备用。同时 选取50例在第371中心医院体检中心体检健康者为 正常对照组。

1.2试剂HA、PEIP、]V-C、LN试剂盒均由深圳市新 产业生物医学工程有限公司提供。

1.3方法

1.3.1血清学检测:采用BECKMAN CX5型全自动生 化分析仪进行用化学发光法检测:HA、P m P、IV-C、LN

四项肝纤维化指标。

1.3.2组织学检查:采用单人1 _s穿刺法对所有病例 进行肝组织活检。并且由B超定位确定穿刺深度，用 16 G穿刺针（德国Bmun公司产品）负压吸引获取肝 组织标本长度2〜5 cm。

1.3.3 HE染色:用10%的甲醛固定，石蜡包埋，Ther- moshandon Finesse: 225型切片机且作连续切片，片厚 4 pm，苏木精-伊红染色，由两位以上病理科医生通过 Mk_〇n-E400光学显微镜进行多视野观察。判断病理 标准炎症分级（G)和纤维化分期（S)。其病理诊断均 符合我国2004年《病毒性肝炎防治方案》^[1]。

1.4统计学分析应用SPSS 15.0统计软件,计量资 料以* ± s表示，采用《检验，计数资料比较采用_X²检 验，P <0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1肝穿组织学改变肝组织纤维化和肝细胞坏死、 炎细胞浸润基本变化趋于一致。炎症程度与纤维化程 度具有正相关性（_X²= 30.616, P <0.01)。见表1。

表1 162例肝穿病理学分级与分期情况  例

分级		SO	SI	S2	S3	S4
G0( n	= 26)	16	10	0	0	0
Gl( n	= 23)	4	13	6	0	0
G2( n	= 48)	6	11	18	10	3
G3( n	= 33)	0	0	6	17	10
G4( n	= 32)	0	0	0	19	13
合计C	a =162)	26	34	30	46	26

2.2.肝纤维化血清学改变血清中肝纤维化的四项 指标均较正常组为高，且随肝纤维化程度加重而含量 逐渐增加（P <〇.〇5或<0.〇1)。见表²。

2.3肝纤维化血清学与肝组织学比较本组乙肝肝

河北医药 2016 年 1 月第 38 卷第 1 期 Hebei MedicaUmirnal，2016,Vol 38 Jan No. 1

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组织纤维化患者血清指标与病理组织学分期的检测结 果显示，16²例患者血清HA、PDIP、IV-C、LN与病理分 期的相关系数分别为〇• 649、0. 507、0• 396、0_ 548 (户<

0.05 或 <0.01)。见表2。

表2 162例患者血清学与组织学检测结果比较 元_±

组别	HA (ng/ml)	PffiPWL)	IV-C( ng/ml)	LN( ng/ml)
正常组（„ =50)	90.1 ±30.4	135.6 ±14.1	54.1 土 8.6	96.5 ±10.5
S0 组（n =22)	141.9 ±29.6	146.2 ±14.4	54.9 ±10.6	101.1 ±9.9
S1 组 U =28)	156.1 ±26.0	146.8±11.6	56.6±11.3	103.0 ±10.6
S2 组U =37)	199.1 ±31.6	187.7 ±16.0	58. 8 ±9. 6	116.0±10.4
S3 组（n =49)	239.9 ±33.4	200.8 ±21.3	66.5 ±11.8	118.3 士 12.1
S4 组（n =26)	439.9 ±29.6	279.9 ±12.2	101.6±13.9,	130.6 ±12. 2
F值	6.031	7.366	6.861	3.686
P值	<0.05	<0.01	<0.01	<0.05

3讨论

乙型肝炎发病率高，是导致肝纤维化、肝细胞癌的 高危因素^[2_5]，在我国肝炎的发病率为1. 3% ^w，其中 家族性感染率较高，严重影响人们的身心健康^[7’^8]。 肝纤维化是肝硬化早期的改变，并且具有可逆性。因 此，探索研究无创性诊断肝炎、肝硬化的方法，对于早 期诊断、及时评估纤维化程度，对乙肝、肝纤维化疾病 的诊治至关重要。

本研究采用肝穿的组织学改变结合血清中的肝 纤维化指标，分析二者之间的关系，评价肝纤维化发生 及其病变程度。HA属于蛋白多糖，由肝内间质细胞 合成，肝纤维化时血清含量升高，实验中发现它随着肝 纤维化的加重，其血中含量逐渐升高，推测HA可作为 肝纤维化、肝硬化敏感指标，准确的反映肝纤维、肝细 胞受损情况。PHIP是瓜型胶原前体，在肝纤维化时， 因各种细胞因子作用于肝窦、内皮、肝细胞等ECM合 成细胞，增加了 m型胶原的合成,我们发现其血清含量 与肝纤程度较一致，因此认为PIP可以作为衡量肝 纤维化的条件之一。IV-C是构成基底膜的主要成分, 是活动性肝纤维化的最佳指标，本研究中发现血清其 含量上升较灵敏，更适合用于肝纤维化的早期诊断。 LN是基底膜中特有的非胶原性蛋白，在肝纤维化时， 研究发现其血清水平升髙，这一结果与Li等^[9]研究相 一致。推测检测血清中的四项指标可适时的预测肝硬 化的进程和严重程度。

本研究发现HA在S3期就开始含量升高,S4期 含量明显升高，比其他肝纤维化指标相比更为敏感。

126例乙肝肝组织纤维患者血清肝纤维化指标HA、 PDIP、]V-C、LN与病理分期的相关系数分别为0. 649、 0.507、0.396、0.548( P <0.05 或 <0. 01)，表明肝纤 维化血清学指标与病理分期呈正相关性，肝内炎症活 动加重时肝脏损害严重，其血清学指标含量也相应增 高，这与有关报道^[1°^]相符。乙肝肝组织纤维患者肝纤 维化不同分期间与血清纤维化指标HA、P1HP、W-C、 LN的检测经两两相比差异有统计学意义（P <0.05 或<0.01)，推测这四项血清肝纤维化指标对判断肝 纤维化较敏感，联合检测四项指标，对肝纤维化的诊断 有较高临床价值。

医学界多年来认为肝穿刺组织学检查是诊断肝纤 维化的金标准，但因其取材局限，而且有创伤，不便常 规随访,临床上难以广泛应用。因此，寻找简单易行、 可靠和便宜，能准确诊断肝纤维化分期的非创伤性诊 断指标更具有重要意义。

本研究发现，血清肝纤维化指标HA、PDIP、]V-C、 LN联合检测，能较好的反映肝纤维化的发生与发展, 对于肝纤维早期诊断、病情观察、判断预后有较高的临 床实用价值，为肝纤维化的无创性检测奠定了基础。

   成都华西华科研究所研发生产无创肝纤维化肝硬化早期检测诊断仪

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