病毒性肝炎患者细胞外基质成分的检测 .肝纤维化的关系与无创肝纤维化肝硬化早期检测诊断方法‘

成都华西华科研究所研究肝纤维化是各种细胞外基质成分    （二）健康献血员（NS) 30例中男25

(ECM)在肝内异常增生和过度沉积所致，主  例，女5例.年龄21〜55岁，平均38. 6岁。

要由肝活组织检査而确诊^[1'\但肝活检难以 进行动态观察，为此、本文对例病毒性肝炎 患者进行了血清ECM检测，结合肝活检免 疫组化研究，旨在探讨病毒性肝炎时血清 ECM含量与肝纤维化的关系及其临床价值《 材料与方法 一、研究对象

(一）肝病患者89例中男66例，女23例. 年龄.18〜69岁，平均41. 5岁。其中急性肝炎 (AH ) 10例，慢迁肝（CPH) 18例，慢活肝 C€AH)21例.代偿期肝硬化CLCJ26例，失代 偿期肝硬化(LC₂)14例。诊断符合1990年（上 海V全国病毒性肝炎学术会议修定的诊断和 分型标准。

二、测定方法

C一)ECM测定血清透明质酸CHA)和 n型前胶原(pc I)检测采用放免法，药盒分 别由上海海军医学研究所和重庆肿瘤所提 供。血清层粘蛋白<LN)和W型胶原（IV —S) 测定采用酶免疫分析法，药盒分别由上海长 征医院和日本第一化学药品株式会社提供。 血浆纤维连接蛋白（FN)测定采用浊度免疫 试验法*药盒由德国Boehringer公司提供。 血清和血浆标本为清晨空腹抽取静脉血分 离，置一 20C冰箱保存待测。

(二)肝活检共计39例，其中CPH 3例， CAH 11例，LCJ1例，LC_S14例。另10例正常 肝组织标本由二军大病理室提供。患者在入

院一周内行快速经皮肝穿剌术取得肝组织， 10%甲醛固定，常规石蜡包埋切片，HE和 Van Gieson染色检镜，参照Knodell标准进 行肝纤维化评分。免疫组化ABC染色观察肝 内I、I : W、V型晈原和LN在肝内的分布。 兔抗兔1型胶原抗体、兔抗人I、IV、V型胶 原抗体及兔PAP,羊抗兔IgG均购自上海医 科大学，兔抗人LN抗体和羊血清购自Sig- ma公貢J。

结果和分析

一、 病毒性肝炎患者血清或血浆ECM

含量变化〔见表1)。

随着CPH向CAH、LC演变，血液中 ECM含量变化愈趋明显。LC由代偿期发展 为失代偿期时.PC *、IV —S、FN含量下降， LN和HA含量进一步升高，其中HA和FN 的改变在两组间有显著性差异（P<〇. 05)。

二、    血清学肝纤维化标志物鉴别CAH 与LC的价值

表1.病毒性肝炎患者血清ECM的含量变ffc<^±4

组別	例数	PC I	IV-S fng/m] 1	LN C^g/1)	FN (ng/m] 1	HA 〈昨/】）
NS	30	76. 3土 29、4	土 28. 3	'66. 7士2L 9	337* 0土79. 3	SS. 0士 £7. 9
AH	10	114.3 土 36.9*	101. 2土39* 5	99,5土30,6"	405. 4 土 102. 3 ■	147“土 451
CPH	18	'9G. 2±3?. 5	123. 3土28,	123 J土45. 2'	450- 5"	120. 3士57. 5*
CAH	21	159, 5土43,16	-14L0 土 51.5-	土 67. 6a	5S1. 4土 104. 1^	239_ 2士 101. 6A
LC1	26	24L 3土80*	之47.4土67,	2此 6士71: 5*	59£- 7土 148.#	381. ?土 121. 0B
LC2	14	22&5士94.1*	229. 5土 107. 1A	31SJ士 114-	365. H士獻 9	461. 3土 149. 8*

注₁各组与正常坦0¹'[3、相比_|*尸<〇.〇5,厶尸<^〇.〇1.«厂<〇.〇(：11

表1血清学肝纤雎化标志勘鉴别LC与非LC的价值

组别	切割值	敏感性	特异性	诊断符合率
PC 1	202	U%	e〇^	82 %
IV-S	19B	^9%	65%	76 D/c
HA	390	76%	71%	74%
LN	276	73^'	72%	72%

从表1可知，血清PC I ' IV-S、LN和HA 含量在CAN组和LG、LC2组间差异显著LP 均<0■ 05八现以CAN组各ECM含量的均 数加一个标准差作为切割值，比较其鉴别LC 与非LC的价值L见表2),发现单项指标W PC

E价值最大，其次为HA、LN和W，S。如联合 检测四项指标以任意两项升高为诊断标准. 则敏感性、特异性和诊断符合率明显升高.分 別为 92%、90%、90%。

三，血清或血浆ECM含量与肝组织学纤 维化程度的关系（见表3),

39例慢性肝炎患者血清PC a、W-S, LN、HA含量随着肝纤维化的升级而增高，两 者间均呈密切的正相关关系(尸<〇. 05)，而血 浆FN含量在肝纤维化早期明显升高，至纤 维化晚期则下降,两者间无相关关系。

表3血ECM含量与肝组织纤维化程度的关系

组别	例数	PC I	IV—s	LN	FN	HA
纤维化〖级	3	98, 2士57. 9	103. 3土43. 5	120. <4土&L 2	469. 3土 92. 4	103, 3土43. 5
纤雄化■级	4	147. 6 土 54‘ 6	137. 2土64. 5	181-9土57, 2	64 7. 7 土 104. 2	137. 2土 64. 5
.纤维化I级	7	191, 3 士 62. 5	1S9.3土 7S-3	257. 3土86. 4	512- 3 土 110, 6	麻 3 土78* 2
纤维化IV级	25	238. 3土 71. 4	251-6土 101. 5	317. 8土 92. 5	493.7土281.1	251. 6 土 101. 5

四、肝硬化组肝组织学ECM免疫组化改

变。

10例正龠肝组织中I、I、IV, V型胶原 和LN的分布基本一致.都位于门脉区，血管

壁、肝窦壁，但各种抗原成份在同一邵位的染 色深浅有差异。W型胶原肝窦染色最清晰，I 型，V型胶原和LN肝窦染色弱。肝硬化组肝 组织中ECM显著增加,扩大的门脉区I、I、

IV、V型胶原軒维明显增生.其中以I型胶原  E、iv-S、LN、HA含董差异显著.提示动态观

染色最深，肝窦壁线条变粗。ECM除了在原察慢性肝病患者血清纤维化指标有助于肝纤

部位增生外.还出现在纤维隔和新生血管中= 讨 论

本文对89例病毒性肝病患者的血液学肝 纤维化指标和部分患者的肝组织病理学研究 表明，病毒性肝炎患者血液和肝组织ECM犮 生了一系列显著的变化.主要表现为各型晈 原、FN、LN和HA等ECM含量异常增多。在 急性肝炎时，由于肝实质细胞损伤出现PC

维化和肝硬化的早期诊断。从本文的研究结. 果可见.单项指标测定以PC H价值最大，其 次为HA、LN和IV-S.但敏感性、特异性和诊 断符合率均不十分理想^故应联合检测各项 指标.综合判断以提高诊断的准确率、避免单 一指标的局陷/注<>

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