肝纤维化患者的临床血清学检测价值分析与无创肝纤维化肝硬化早期检测诊断方法

 [摘要]目的成都华西华科研究所研究探讨肝纤维化患者血清中肝纤维化标志物的水乎及意义。方法检测120例肝纤维化患者血清 标本中HA、LN、C- IV、TIMP-1、PC- ffl、MMP-l、TGF-ft和TGF-ct水平，并与对照组结果比较分析，评价其相 关性。结采肝纤维化患者HA、LN、C- W、TIMP-1和PC- I与对照组比较均有显著性差异（FC0.05或0.01)。 MMP-l、TGF-ft和TGF-_a与对照组相比较无显著性差异(P均>0.05)。结论 HA、LN、C- IV、TIMP— 1和PC— DI 与炎症及纤维化程度有较好的相关性，对观察慢性肝病患者纤维化和炎症性改变及其进展具有较高的价值。

[关键词]肝纤维化；血清学检测；透明质酸；层粘蛋白；W型胶原；基质金属蛋白酶抑制剂

肝纤维化不是一个独立的疾病，而是许多慢性肝病的共 同病理过程。本病是一个逐渐量变的过程，反复的肝细胞炎 症使得肝脏反复代偿修复，伴随实质细胞的再生及周围组织 的重建，病理修复的结果最终导致肝纤维化的形成^[1]。各种 病因引起的慢性肝损害都有炎症、坏死及纤维化等病理改变， 炎症、细胞坏死导致的肝纤维化是由于破坏了肝脏的生态系 统，早期肝纤维化可以逆转，而晚期则会发展为肝硬化直至肝 功能衰竭，故早期诊断肝纤维化对于慢性肝炎尤其重要。肝 活检病理诊断是诊断肝纤维化的金标准，te床已经得到一定 运用^[2]。为探讨透明质酸(HA)、层黏连蛋白（LN)、m型前胶 原(pc- in)和iv型胶原(c-iv)等血清肝纤维化指标的临床 应用价值，笔者进行了相关研究。

1临床资料

120例为健康体检者，男98例，女22例；年龄（39.05 土 10. 40)岁；病毒标志物检查阴性，排除肾病及恶性肿瘤（肺癌、乳 腺癌、结肠癌、胃癌等），肝功能及血总胆固醇、三酰甘油、髙密 度脂蛋白检查正常，既往无肝炎及其他慢性肝病史，无心脏 病、髙血压病史，无饮酒及吸烟习惯。

1.2标本采集抽取空腹静脉血3 mL,放置干燥管中离心分 离血清，-201：冰箱保存,1周内一并检测。基质金属蛋白酶-1 (MMP-1)、基质金属蛋白酶抑制剂-l(TIMP-l)、转化因 子-(31(丁0?-(3₁)采用酶法（£1^八)检测；转化因子丁0?- a、HA、C- W、LN，PC- DI均采用放射免疫法(RIA)检测。

1.3统计学处理实验数据用SPSS 15.0程序进行统计学 处理。计量资料用均数±标准差表示，若是正态分布，用方差 分析;若是非正态分布，用秩和检验。以尸<0.05为有显著

11 一般资料患者组120例肝纤维化患者均为我院2008 年1月一2009年2月的住院者，诊断符合2000年全国传染 病与寄生虫病学术会议修订的《病毒性肝炎防治方案》相关诊 断标准^[3]。男100例，女20例；年龄12〜78(38.80 土 11.18) 岁；急性肝炎75例，慢性肝炎25例，肝硬化20例。对照组

性差异。

2结 果

患者组HA、LN、C-1Y、TIMP-1和PC- 1D水平与对照 组比较均有显著性差异，而MMP-l、TGF-ft和TGF-a与 对照组比较无显著性差异。具体结果见表1。

表1 2组血清中肝纤维化标志物的检测结果U±s,_Mg/L)

组别	MMP-1	TIMP- 1	TGF-I3,	TGF~a	HA	pc - m	C-IV	LN
患者组	7.5±2,4	221.7 ±54.4®	45.5 + 11.5	9.4土4,2	135.0±84.9®	111.0±40,8®	106.5 ±30.2®	159.5 + 32.5®
对照组	6.8±2.5	168.4±23.1	42.1 ±9.9	7.9±2.5	59.5±12.0	76.8± 12.5	40.5 + 7.8	120.8 ±20.9

注：①与对照组比较，P<0_05;②与对照组比较，PC0.01。

3讨论

据权威统计，目前我国有慢性无症状乙肝病毒携带者约 1.2亿，这些患者如果不控制治疗，随着年龄增长则更舄发生 肝纤维化，进而进展为肝硬化及肝癌，给患者和社会造成沉重 的负担^[4]。因此研究者们通过不同方法的研究力图寻找出廉 价高效无创的指标以便及早诊断肝纤维化，寻找有效的治疗 方法以阻断和逆转肝纤维化发生和发展，防止肝硬化。

肝脏是一个完整的生态系统，有着自身的平衡，肝脏各种 细胞及细胞外间质均保持一定的数量、比例及相对空间位置， 某一成分发生质或量的改变就会影响到其他成分的结构与功

能，导致生态系统的失衡。慢性肝炎使得肝实质细胞及其所 占空间减少，间质细胞及细胞外间质增多，尤其是I与IV型胶 原比例增大。肝纤维化是肝组织创伤修复的过程，也是各种 慢性肝病的共同病理归宿^[5]。肝星状细胞调节肝纤维化的过 程，肝损伤使星状细胞激活，转为肌成纤维细胞，成为基质蛋 白的主要来源。肝纤维化诊断的金标准是肝组织活检，但由 于其有一定的损伤及痛苦，在临床上不便开展。

近年来，一些非损伤性诊断指标的应用，对肝硬化早期诊 断具有积极意义。研究表明肝脏内肝星状细胞（HSC)的激活 是肝脏纤维化发生的中心环节，并最终导致肝脏内细胞外基质的过度沉积。围绕这些研究结果，国内外的学者们发现了 较多与肝脏纤维化密切相关的血清学指标，这些指标可以大 体分为3类：细胞外间质成分（ECM)、胶原酶类和细胞因 子^[6]。其中PC- DI为m型胶原的前体，主要由肝星HSC合 成。进一步研究发现PC- ffl在肝纤维化的晚期合成速度减 慢，其反映肝脏纤维化程度的敏感度尚存在一定的缺陷。C-W 在肝纤维化发生早期可见其增生，后与持续沉积的LN形成 完整的基底膜，即“肝窦毛细血管化”。因IV型胶原在合成代 谢过程中不去除端肽即沉积于细胞外基质，故血清中1Y型胶 原含量的升髙反映了肝血窦基底膜的形成加快。基础和临床 研究均发现，血清IV型胶原水平和肝纤维化、门静脉高压程度 密切相关，而与肝脏炎症活动指数关系较小。同时研究发现， 血清IV型胶原的检测对判断肝纤维化和肝硬化均具较高的敏 感度和特异度。LN主要来源于HSC,其在细胞粘连、分化和 基因表达中起重要作用^[7]。肝纤维化发生时，LN大量沉积 于肝窦内皮细胞间隙，降低内皮细胞的通透性使其毛细血管 化，并使门脉压升高，故可反映肝窦毛细血管化和汇管区纤维 化。HA是一种糖胺多糖，由HSC合成后经血循环到达肝血 窦内皮细胞降解。肝脏受损时合成增多，降解减少，血清HA 水平增高。HA是反映肝纤维化程度最具价值的血清学标志 物。随着肝纤维化程度的进展，HA升高的绝对值和阳性率 也增髙，并与组织学病变的严重程度呈正相关。与肝纤维相 关的胶原酶类有基质金属蛋白酶及其抑制物，基质金属蛋白 酶及其抑制物的平衡在ECM降解过程中起着至关重要的作 用。基质金属蛋白酶主要由HSC和Kupffer细胞分泌表达， 主要参与降解胶原、蛋白多糖等细胞外基质。TIMPs在肝脏

(上接第3103页）示其诊断肿瘤骨转移的敏感性和特异性分 别为96.5%和100%^[3]。脊柱转移瘤MRI信号表现为_：Ti 加权像呈低信号,T₂加权像和脂肪抑制成像示高信号，MRI 对水肿灵敏，有较好的软组织分辨率，可直接显示脊柱转移 瘤、椎弓，神经根及脊髓本身的侵犯情况，比核素骨显像更具 敏感性和特异性^[4]。而最近有研究表明，对来自于黏液样脂 肉瘤的脊柱转移瘤的诊断，MRI比核素骨显像和PET更敏 感^[5]。但MRI对单发病灶、椎体血管瘤也有假阳性，且设备 及检查价值昂贵，检查费时，部位局限，也有不足之处。

本研究结果显示，核素骨显像诊断脊柱转移瘤的灵敏度 和阳性预测值分别为96%和95%,MRI诊断脊柱转移瘤的 灵敏度和阳性预测值分别为92%和91%，两者诊断效率都较 高，核素骨显像与MPI诊断脊柱转移瘤的灵敏度和阳性预测 值相比均无显著性差异。两者结合使用诊断脊柱转移瘤的灵 敏度和阳性预测值均达到100%。因此，对怀疑脊柱转移肿 瘤患者的诊断，首先使用核素骨显像检査，在了解脊椎骨的同 时可观察全身其他骨骼的情况，进行初步的筛选诊断，而 MRI作为核素全身骨显像的必要补充检査，可使骨显像的假

中主要来源于HSC、Kupffei•细胞，其对MMP2降解ECM有 特异性抑制作用。肝纤维化早期，MMPs轻度增高，而肝纤维 化中晚期，MMPs活性则明显降低。

根据本文结果，8种肝纤维化指标中HA、LN、C- IV、 TIMP-l、PC-ffl应作为肝病检测首选指标。由于单一指标 只能反映肝纤维生成或降解的一方面，因此几种标志物联合 测定可弥补单一指标存在不足，提高特异性和诊断率,减少误 诊，有利于对肝病动态的观察。但对如何组合成最佳方案，有 待于进一步的分析和探讨。

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