肝纤维化血清学诊断研究进展与无创肝纤维化肝硬化早期检测诊断方法

血清学诊断是研究最早、最广泛的肝纤维化诊 断方法，其取材方便.价格低廉.因而较为实用：

胶原蛋白对肝纤维化的诊断价值

胶原蛋白在正常肝蛀内约占蛋白总量的5%〜 10%.肝硬变时.胶原蛋白可增加到SO %左右.目 前发现肝内有5种主要胶原蛋白，分别是I、I , IV、 V , Vt型胶原蛋由.其中Z以I、I型为主^

一、    I型胶原（CI>_;目前报道测定CI应用 最广泛的是检测I型前胶原氨基端肽（PUP)和I 型前胶原〔PC I )。大多数学者认为P I P与肝纤维 化的活动度有密切关系，血清PIP水乎随肝纤维 化程度的增加而升高.可怍为反映肝纤维化活动度 和程度的一项指标.同时与肝驻炎症、坏死也有关。 Guechot等认为PI P可区别不同类型的肝病₌但也 有人认为血清PIP对区分各神肝病的意义是有限 的。血清P I P水平受年齡等因素的影响，故血清 PIP测定诊断肝纤维化的特异性是有限的。肝纤 维化时，血清PCI含量增高的可能原因有两点_：

1.  与门脉压的显著升高有关，门眯高压时分流增 加.肝K对PC I的清除咸少与肝内mRNA的 含量明显下降有关.mRNA减少时，肝脏对PCi摄 去和排泄能力下降。王沁等研究发现血清PC I水 平与肝纤维化程度、□脉高压、Child分级呈正相关， 与肝功能损伤指标不相关。

二、 I型晈原（C1):目前报道测定C1的不 同成份有：C I氨基端肽tPINP), C I羧基端肽 (CTCP>、I型前胶原肽（PTCP)或C 1本身大分子 以及其它降解产物.对此临床评价不一。杨永平等用 ELISA法检测12S例不同类型肝炎患者血清C I、 CI含量，并与病理改变进行分析，结果显示C1水 平与肝纤维化程度相一致；C I水平能更好地反映 早期肝纤维化程度；I /I型胶原比值对判定肝纤维 化程度较重要-Niemela等测定不同严重程度时酒 楕性肝病患者血清PICP水平并与临床实验结合指 标和组织学结合指标作相关性分析，结果发现血清 FICP水平与两者均有显著相关性。

三、 IV型胶原（CW   是由三股螺旋中心K, 氨基末端（7S>和羧基末端球状片段<NCI〕组成网 状结构.U等用R1A法检测慢性肝病患者C1V含 量.发现血清CW水平与肝纤维化程度有显著相关 性„ Ala-kokka等测定实验性肝纤维化，大鼠血清C IV 7S段含量，认为在反映肝纤维化，尤其是早期纤 维化方面.血情7S段优于P n P_B Schuppan等对2 例严重纤维化肝病患者随访5〜8 t■月.发现血清 NCI段与PUP出现的时间过程不一致，多呈分离 现象，NCI段下降的同时PBP增加预示纤维化肝 病预后不佳。

四、    VI型晈原(CW):CV1是细胞外基质〔ECM) 中穿梭于【、丨、W型胶质组成的纤维束间的纤细， 链条状结构，血清C VI来源于组织C IV降解，其血猜 含量增高反映组织内新生成或已沉积的CW降解增 加。纪徐淮等^m检测用四氰化碳处理的大鼠血清C VI含童，发现在制造肝纤维化模型大鼠的肝细胞变 性、坏死朗，血清含量叩开始显著升高.并与肝纤维 化程度呈正相关.提示血清CW测定可较好地反映 肝蛀内CM的代谢状况，是反映晈原降解有价值的 指标，有助于肝纤维化的早期诊断与预后判断。

相关酶类对肝纤维化的诊断价值

一、    脯氨酰S化酶tPH): PH是晈原合成的关 键酶，由〇■、P两t■亚单位构成四聚体，肝硬变患者 的肝脏中PH含量明显升高，但在血中SfPH活性 有困难，因为其有活性的PH四聚体不到10%,且 血中存在抑制物^ PH分子中a亚单位易分解，P亚 单位较稳定，应用夹心_联方法澜定血清免疫反应 性晡氨酰羟化酹P亚单位.证明其含量与肝纤维化 程度有关，主要反映肝纤维化的活动性。

二、    金属蛋白酶〔MMP>及其抑制物：在细胞 外基质过程中起非常重要的作用。由于血清中存在 抑制其活性的因子，直接测定MMP.结果并不可 靠，最近有报道可测定血清MMP的组织抑制因子 〔TIMP^^]。U等发现病理诊断为小静咏周围纤维 化和弥漫性肝纤维化患者，血清TIMP水平较正常 人和酒精性睹肪肝患者显著升高，且与肝纤维化评 分呈显著正相关。血清TIMP水平能很好反映肝纤

维化活动度.对判断肝纤维化预后价值较大

三、脯费酸肽薛（PLD): PLD是体内广泛存在 的一种蛋白水解薛，能裂解晈原蛋白脯铒酸和羧脯 賅的羟基末端的费基二肽.与胶原蛋白分解代谢有 关，胡杨睥报道肝硬变PLD升高与肝细胞急性损伤 关系不大，与纤维化有关„但也有人持相反意见，认 为PLD活性与肝细胞变性、坏死有关，而与肝纤维 化无密切关系.还有人认为，PLD与炎症和纤维化 都有关，但与炎症相关性高于纤维化。

非胶原蛋6对肝纤维化的诊断价值

一、    层粘连蛋白（LN) : LN经蛋白#消化产生 7个肽链片段，目前研究和检测的LN主要为片段1 (LNP1).在正常肝组织中无LN,且肝窦壁上时IV 型晈原是不连续的，肝纤维化时，肝窦壁的I、I型 胶原增加，同时出现LN, W型胶原变成连续性，LN 粘闲■其它胶原蛋白形成真正的基底膜，即肝窦毛细 血管化^[5]，为门脉高压形成的^u后向学说”提供了极 重要的病理学基础，可以认为LN是反映纤维化增 生的指标，并可怙计门脉压力的改变。Komer-W 认为在反映肝细胞损伤、肝纤维化程度方面LN优 于透明质酸（HA).韩捷等⑴发现肝硬化患者LN水 平与肝活检组织釺维增生程度呈正相关.与门咏压 力呈正相关，说明血清LN含量随肝纤维化程度加 重、门脉压力增高而增加。但也有人对此持不同意 见，认为血清LN水平与Child分级正相关，但与f7 脉高压不相关.多因素分析发现肝功能不全导致 LN洚解障碍是血清LN升高的机理之一，LN也存 在非特异性问®，目前发现恶性肿瘤和胰腺疾病血 清LN水平也升高，从而使其应用价值存在一定的 局限性。

二、    钎维连接素（FN)及其受体：FN是一种糖 蛋白，由肝脏内皮细胞和窦内皮细胞产生，主要位于 肝窦壁内，与I、B、W型胶原共存，起支架作用. 肝纤维化早期纤维间隔和肝窦壁上首先出现FN, 然后才出现其它间质成份。目前对血清FN诊断肝 纤维化的意义仍存在争议，似乎作为肝细胞损伤的 指标更为肯定，纤维连结素受体（FNR)是细胞粘 附分子受体之一，肝纤维化时，可在肝细眙窦周浆瞋 和纤维增生区过量表达.最近有人用ELISA法测定 血清FNR.发现各型慢性肝病和肝硬化患者血清 FNR明显增高，并与组织学检査相一致，推测血清 FNR增高可能与肝组织中过量的FNR降解有关， 认为血清FNR可作为诊断肝纤维化的有效指标。

三、    透明质酸（HA): HA主要由肝内H质细咆

合成，经淋巴细胞进人血循环，除少量滞留于睥脏、 淋巴结和骨髓外,大多数由肝窦内皮钿咆摄取，最终 降解为乙酸和乳酸。肝硬变时血清HA升高可能与 下列因素有关：（1)肝细咆受损，内皮细咆数量减少、 功能臧退，导致分解代谢能力降低；（2>门脉分流. 肝脏对HA清除减少；（3>肝内纤维组织增生时，间 质细胞、成纤维细胞合成HA增加，向血内释放增 多₅ Murauaki等^[|!:研究表明血清HA水平与肝纤维 化程度有显著相关性.并不受年龄因素影响，在反映 肝纤维化程度方面优于CW -7S,在诊断肝纤维化准 确性方面■ HA明显高于PIP。

作为肝纤维化血清标志物，其机理各有不同.如 PIP/PC1倾向于反映晈原合成的情况，CW和 PLD代表晈原降解程度，HA反映肝纤维化活动及 肝损伤.LN则反映基底膜转化，与n脉高压有一定 关系，而且在各型肝病中有较大重ft，因此，最好选 择几种标志物联合检测可互相补充，可更准确地判 断肝纤维化进程.另外，也应注意在已稳定建立的肝 硬化.如无活动性基质沉积，即使有广泛的纤维化. 也可无血清标志物异常。

成都华西华科研究所研发生产无创肝纤维化肝硬化早期检测诊断仪

网址:http:// www.qctqct.cn 

手机 : 13072875151传真 :028-65830598

市场部电话 :028-65830598 028-67708638 

在线 QQ:110480527 联系人 : 王先生

邮箱:samwangcn@126.com

地址 : 成都市静康路536号