结缔组织生长因子在肝纤维化诊断中的临床意义与无创肝纤维化肝硬化早期检测诊断方法
结缔组织生长因子在肝纤维化诊断中的临床意义与无创肝纤维化肝硬化早期检测诊断方法
【摘要】目的成都华西华科研究所研究讨论结缔组织生长因子CTGF在肝脏纤维化诊断中的临床意义。方法对我院2年 内的肝脏纤维化患者的CTGF资料进行回顾性诊断分析，与健康患者CTGF水平对照分析。结果观察 组患者CTGF水平逐渐增加，S4期CTGF(49_ 56 ± 15. 63)ng/ml，与对照组相比差异显著（《 =2. 365，P =
2. 008)，具有统计学意义（P <0.05)。结论CTGF检测能够反映出肝脏纤维化病变的发展过程，有利于 肝脏纤维化的动态评价。
【关键词】结缔组织生长因子；肝脏纤维化；检测
结缔组织生长因子（CTGF)最初在1991年在研究人类胳 静脉内皮细胞过程中，在血小板源性生长因子（PDGF)诱导 条件下能刺激纤维母细胞DNA合成并且具有趋化作用而被 命名u]。CTGF在细胞的粘附、基质形成以及组织结构的重 建、再生及分化中具有重要作用。肝纤维化是由各种原因情 况下引起的一种慢性肝损害而导致形成的病理过程,是肝硬 化发展形成过程中的必要阶段。在全球范围内肝硬化是一种 常见病，是人类死亡的主要原因，我国是肝炎、肝硬化的高发 区，有资料报道我国乙肝病毒携带者约有1.3亿，其中乙肝患 者约3 500万，患者存在不同程度的肝脏纤维化病变。我科 在总结国内外CTGF的研究基础上，验证CTGF作为肝脏纤 维化、肝硬化早期诊断中的研究意义。
一、资料与方法
3. 一般资料:采用整体抽样方法在2011年1月至2012 年8月间，选择我院收治的45例肝脏纤维化患者作为研究对 象，定为观察组，男24例，女21例，年龄39 ~75岁，平均55. 5 岁，为使观察具有同一性，入组患者均为乙肝病毒携带患者及 乙肝患者，病程6 ~40年。同时选择同期在我院正常健康体 检患者15例作为对照组，其中男7例，女8例，平均54. 5岁， 体检报告均为正常，两组患者一般资料相比差异不显著，不具 有统计学意义（P > 〇. 05 )，具有可比性。
4. 纤维化标准:采用Schemas分期标准,分别为共 5期,S。为无肝硬化,S,、S2为轻度肝硬化，S3、S4为重度肝硬 化[2]。
5. 检验方法:观察组均为住院患者，在人院后第二日晨起
空腹采集静脉血2 ml，体检患者为检查当日空腹抽取静脉血 2 ml,送至我科，血液3 000 r/min髙速离心10分钟，留取上清 液并保存在-80 T；的冰箱中，待检。采用双抗体夹心ELISA 方法检测血清CTGF水平，CTGF试剂盒选自美国uscmife science technology company公司生产，其他试剂及仪器由大庆 龙南医院免疫室提供。操作过程按照试剂盒说明书进行，采 用上海MK3酶标仪,在波长450 mn处读取血清CTGF浓度 值。
6. 统计学方法:所有数据应用SPSS 13. 0统计学软件处 理，计量资料比较采用t检验，P< 0.05为差异有统计学意 义。
二、结果
观察组与健康对照组CTGF检出情况详见表1，对照组 CTGF( 17. 60 ±9. 68)ng/ml，与肝纤维化SQ-S3各期比较差异 不显著，不具有统计学意义（P>〇. 05)，S4期CTGF(49.56 ± 15. 63) ng/ml，与对照组相比差异显著（t = 2. 365,Z3 = 0. 008)， 具有显著统计学意义（P <〇. 05)。
讨论人类CTGF基因位于染色体6q23上，长度约 3kbP,结构上由5个外显子和4个内含子组成。CTGF结缔组 织生长因子主要位于细胞质，在成人的结缔组织中、心、脑、 肺、肝、肾、肌肉、胰腺以及胎盘等结构中，均有CTGF的表达， 而且以肾脏表达最为丰富，绝大多数的CTGF在细胞外间隙 中被分泌，并且发挥生物学功能。
肝脏纤维化是针对肝脏损伤的慢性反应,在肝脏纤维化 过程中，伴随着组织结构的损伤修复和瘢痕形成，肝脏内间质 细胞在损伤的刺激下，受到激活并且增殖[3]，引起细胞外基 质（ECM)的大量堆积，造成肝胶原的构成比发生变化，进一
表1两组患者CTGF情况（ng/ml)
|
项目 |
对照组 |
S〇 |
Si |
s2 |
S3 |
s4 |
|
例数 |
15 |
8 |
13 |
14 |
7 |
3 |
|
CTGF |
17.60 ±9.68 |
16.56 ±8.98 |
21.17 ±9.47 |
20.05 ±8.67 |
27.65 ±21.85 |
49.56 ±15.63 |
|
Z值 |
|
-0.043 |
-1.631 |
-1.508 |
-0.038 |
2.365 |
|
P值 |
|
0.966 |
0.119 |
0. 148 |
0.068 |
0.008 |
步引起肝脏组织结构和功能发生改变，最终发展成不可逆的 肝硬化和肝衰竭。
结缔组织生长因子CTGF在肝脏纤维化的形成过程中具 有至关重要的作用,CTGF是富含半胱氨酸家族中的成员，是 其中一种蛋白，在纤维组织中CTGF大量表达发生，主要发生 在转录水平,在动物和人类的肝脏纤维化过程中，被激活的肝 脏星状细胞过度表达CTGF,而且早有研究表明，肝脏星状细 胞的活性与多种细胞因子、生长因子的相关基因的增量表达 具有线性关系[4]，这些基因的表达，进而产生更多的能触发 肝脏纤维化的细胞因子和生长因子。
肝脏纤维化的进一步发展会发展成为肝硬化，严重威胁 身体健康，因此准确评估肝脏纤维化病变的进展具有十分重 要的临床意义。通过本研究可以看出，采用双抗体夹心 EUSA方法检测血清CTGF水平，发现整体上随着肝脏纤维 化程度的加重,CTGF的含量逐渐增加，在S4期增高的表达量 和健康对照组相比具有统计学意义（P <〇. 〇5)。因此可以看 出CTGF检测能够反映出肝脏纤维化病变的发展过程。
肝脏纤维化的早期诊断与动态监测对于慢性肝病的治疗
与改善预后具有十分重要的意义，通过有效的治疗，能够及时 有效的防止肝硬化进展，临床上肝活检是诊断肝纤维化的金 指标,但是由于具有创伤性，不能广泛用于肝纤维化的动态观 察，通过本研究可以看出血清学标志物CTGF检测能够有利 于临床对患者病情做出正确评估与诊断[5]，值得临床推广应 用。
成都华西华科研究所研发生产无创肝纤维化肝硬化早期检测诊断仪
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