血清a型前胶原对肝纤维化的诊断价值与无创肝纤维化肝硬化早期检测诊断方法
血清a型前胶原对肝纤维化的诊断价值与无创肝纤维化肝硬化早期检测诊断方法
提要用放免法测定im例慢性肝炎、叮-哽化患者血淸m型前胶® (Pcin)和in型前胶原肽（pmp) 含量。结果表明血清FCffl和PIHF定量明显相关（r = 0.5i0i),血清PCin与胆江素、ALT、白蛋白和HBV DN A等指标不相关。提示血清PCAI检测作为诊断肝纡，维化的血清学指标，可能较血清PI1IP测定更为 可靠。
关S1词血清胶原ifn癀!1塑_前胶原肚纤维化
肝纤维化是各种慢性肝病向肝硬化发展 的必经阶段。探讨早期诊断肝纤维化，动态 观察肝纤维化过程的临床指标，是近年来颇 受重视的研究课题之一。国内外的许多学者 报道，血清DI型前胶原肽（Precollagen Typem Peptide，PmP)是诊断肝纤 维化较好的血清学指标，但因PfflP进口 药盒价格昂贵，不易推广应用。我们应用国 产血清HI型前_胶原（PrecoUagen Type ffl,PCffl)试剂盒测定慢性肝炎、肝硬化患 者的PCm含量，以探讨PCffl测定在肝纤 维化诊断中的惫义。
材料和方法
一、栓测对象：102例病人中男性63例，
女性39例，平均37.2岁。其中慢性迁延性肝 炎2S例，慢性活动性肝炎45例，肝炎后肝硬 化31例。有74例患者血清HBsAg阳性。4 例经肝穿确立诊断。临床诊断按1990年全国 病毒性肝炎会议制定的诊断分型标准，正常 对照组血清来自健康献血员40例，平均年龄 35.9 岁。
二、方法：全部病人均在入院时抽静脉 血置-30^保存。果用德国Behringwer- ke公司生产的药盒，应用RIA法测定血清 PfflP含贷，结果以ng/ml计算0采用重庆 肿瘤研究所制备的PCm试剂盒，：RIA法测 定血清PCm含量（Fj-2008型自动丫-免 疫计算器)，以kg/L为单位。批间CV= 2.2 %，回收率：98%。血清HBV DNA采
* SI •
用聚合海链反应（Polymerase chain
reaction，PCR)技术检测，HBV引物标 结 果
准品购血清PCm和PEIP含量检测
表I 患者和正常人血清pcm和PmP定置
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组別 |
|
Peg C^ig/Lj |
|
|
PIP CiLg/mO |
|
|
n |
x±SD |
Pft |
n |
x±SD |
P值 |
|
|
慢迁肝 |
lfi |
109.51±61■抑 |
<0.0025 |
26 |
ll.G2±7.74 |
<0.01 |
|
慢活肝 |
33 |
214.3士71,53 |
<0.001 |
45 |
18.64±7.34 |
<0.001 |
|
肝硬化 |
|
£35土91.17 |
<0.001 |
31 |
2 幻.82土8,08 |
<0,001 |
|
正常人 |
1£ |
58.73士16.22 |
|
iO |
8.2S士1.2 |
|
肝纤维化过程和局部取样误差等不足£<’1
用t检验法与正常人比较，慢性肝炎及 肝硬化病人血清pcm和Pmp含量均显著 增高，其中慢活肝及肝硬化的上述指标较慢 迁肝的变化更为显著（P均<〇.〇5)。患者血 清PCffl和PmP含量明显相关cr = 0.51)。
二、血清PC m含量和肝功能的关系 取静豚血测定血清pcm含量同时检测 血清ALT、胆江素和白蛋白定量，以及 PCR技术测定血清HBV DNA，井分析上 述指标与PC m的相关性。结果表明，慢性 肝炎及肝硬化病人的血清pc in含量与血清 ALT、胆红素，白蛋白和HBV DNA不 相关》
讨 论
血清PmP是m型前胶原经氨基端内切 肽酶作用脱下来的多肽。目前认为肝脏至少 有5种胶原，以I、m及iv型为主。肝硬化 早期以m型胶原合成增多为主；晚期以I型 胶原合成增多为主细胞合成胶原先以前 胶原形式分泌出细胞外，经内切肽酶作用， 前胶原释出羧基端和氨基端多肽转化成原胶 原分子，相互交联成胶原纤维^ PmP为 pcm裂解下来的氨基端多肽，测定其含量 可反映m型胶原的代谢。1979年Rohde氐 等首先建立了血清Pfflp放免测定法，并证 实其对肝纤维化有临床诊断意义1933年 德国有了商品试剂盒e以后许多学者报告， 血清Pmp是反映早期肝纤维化程度和活动 度的良好指标，可弥补肝活检不能动态观察
1985年Galambos氏等建立了血清:PC m放免测定法的分子量较PmP约高 10倍多，正常范围72.8±8.叫g/L0根据肝活 检中纤维化活动度分为1〜3级，随着肝纤 维化的活动度增加，血清PC ffl水平递增…， 提示血清PCm与PmP有相同的临床意义。 目前澜定PmP的抗原多从动物胎皮中提 取，如从山羊胎皮或牛胎皮中提取m型前胶 原做为抗原。本实验采用的试剂盒从人工流 产的胎皮中提取抗原，可避免人类与动物胶 原分子结构上的一些抗原决定簇的某些差 异，因此，测定方法中所用抗原取自于人较 动物更为理想[n。
我们应用国产pc in试剂盒测定了 72例 慢性肝病患者血清Pcm含量。结果慢性肝 炎和肝硬化病人血清pcm水平均髙于正常 人，其中以慢活肝和肝硬化的升髙更为显著。 这些患者血清pcni水平升高与血清PmP 含量增多明显相关，而与血清ALT、胆红 素、白蛋白和HBVDNA等肝功能指标和 乙肝病毒标记物均不相关。有些学者发现肝 细胞炎症和坏死均可使在肝内存在的m型肢 原裂解以致血清Pfflp值升髙，因而PIIIP 值不一定提示胶原形成的增加。本文结 果显示血清pcm含量与肝细胞损伤指标无 相关，提示pc in测定可排除肝细胞炎症和 坏死等原因，且有价格便宜，易于临床常规 开展检测等特点，对肝纤维化的诊断价值可 能优于血清Pin p检测。
'成都华西华科研究所研发生产无创肝纤维化肝硬化早期检测诊断仪
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