化学发光法在肝纤维化血清学指标检测中的应用与无创肝纤维化肝硬化早期检测诊断方法

摘要目的:探讨化学发光法在肝纤维化血清学指标测定中的应用价值。方法:对确诊的慢性乙型肝炎患者76例采 用化学发光法测定血清纤维化指标水平，并进行肝组织纤维化分期。结果_:HA、PD1 P、iv.c与肝纤维化分期的相关 系数分别为0. 693(p<0.01)、0. 753(p><0.01)、0. 742(尸<0.01)，说明随着肝纤维化程度的加重，HA、PfflP、IV. C血 清水平逐渐升髙;而LN与肝纤维化分期无相关性。结论:慢性乙型肝炎患者血清HA、PIDP、IV. C水平对肝纤维化 的早期诊断有一定意义，检测结果具有髙灵敏性、高稳定性、无交叉污染、报告时间大大缩短等优点。

肝纤维化是慢性肝病发展为肝硬化的必经病理 过程。实验证明早期肝纤维化阶段是可逆的^[2]，因 此早期检测对于慢性肝病的治疗和预后判断具有重 要意义^肝纤维化诊断主要靠组织病理学、影像学 及血清学指标，其中病理学是诊断的金标准。由于 肝活检取样的误差性和创伤性，人们致力于寻找血 清学指标来监测肝纤维化的发展进程。近年来，大 多数专家认可、临床上已普遍开展起来的敏感而实 用的血清学指标有4种:透明质酸（HA)、层粘连蛋 白（LN)、ffl型胶原前肽（PfflP)、]V型胶原（IV.

C)^[3~^5]。因此，这4种血清学指标的准确检测对慢 性肝病患者肝脏纤维化程度的判断具有重要意义。

本研究采用化学发光法检测76例慢性乙型肝炎患 者HA、LN、PIEP、IV. C 4项血清学指标，并与肝脏 病理学进行对照观察，对结果进行比较分析，现总结 报告如下。

1对象与方法

1.1研究对象收集本院2007年6月〜2007年9 月慢性乙型病毐性肝炎住院患者76例，按照2000 年修订的病毒性肝炎防治方案的诊断标准^[1]，均符

合慢性乙型肝炎诊断。全部病例均进行肝组织学检 査，留取清晨空腹静脉血5ml,分离血清，冻存待检。 1.2血清学指标检测 .

1.2.1仪器与试剂:使用德国Lumino准自动化学 发光免疫分析仪器，试剂盒由深圳市新产业生物医 学工程有限公司提供。     _

1. 2. 2方法:检测M例慢性乙型“毒性肝炎患者 肝纤维化4项血清学指标，HA用免疫发光竞争法， LN、PDIP、]V.C用免疫发光双抗体夹心法。所有 检测均严格按照试剂盒说明书操作。

1.3标本处理与病理学检查采血当日行肝穿刺 检査，穿刺组织长度为1. 〇〜2. 0cm，用中性10%福 尔马林液固定标本，石蜡包埋，连续切片，常规染色 HE、网状纤维和Masson三色染色。显微镜下进行 肝组织病理学炎症分析，纤维化分期，将肝脏炎症活 动度分为G„〜G₄，纤维化程度分为期，

1.4统计学方法计量资料数据以芝表示，用 SPSS10. 0软件进行Spearman等级相关分析。

2结果

2.1采用化学发光法检测血清肝纤维化指标与病

理分期的相关性.HA、PDIP、]V.C与肝纤维化分 期的相关系数分别为〇. 693(P<0. 01)、0. 753(P<

1.  01)、0. 742(P<0. 01)，说明随着肝纤维化程度的 加重，HA、FIDP、]V. C血清水平逐渐升高；而LN 与肝纤维化分期无相关性.。见表1。

表1化学发光法对肝纤维化4项血清学标的检测结果

分组	例数	HA	LN	PIIIP	IV. C
Si	21	57,8 土 45 J	39.4±2U	17.4±9.f	15.4 土 8.2 .
Sz	17	179.9 士 15】.8	33.1 士】6.6	37.1+22.3	28.1 士 8.1
S3	18	205.8土 110.6	75.2+42.4	40.6+13.3	32.2 土 6.3
Si	20	507.5+252.2	58.3 土 17.6	65.8 土 25.7	37.617.2
r值		0.693	0.441	0.753	0.742
p值		0.000	0.276	0.000	0.000

2.2采用化学发光法检测肝纤维化血清学指标的 优点检验过程无交叉污染、报告时间大大缩短，其 检验结果灵敏性高、稳定性高。

3讨论

肝纤维化早期诊断和防治对于阻止肝纤维化发 展为肝硬化具有重要意义。肝活检是目前肝纤维化 诊断的金标准，但由于肝活检为有创性检查，不便于 重复进行。近几年来，临床研究者一直在寻找能较 好反应肝纤维化发生和发展的非侵人性血清学指 标，它们可以是独立的一个，也可以是一组血清学指 标，但无论是哪种情况，这些指标必须具有以下特 征:可靠、准确、重复性好且易于操作。目前，被大多 数专家认可、在临床上已普遍开展起来的敏感而实 用的血清学指标有4种:透明质酸(HA)、层粘连蛋 白(LN)、ID型胶原前肽(P HI P)、IV型胶原（IV. C)。 HA、LN、PEIP、]V.C不仅在肝纤维化早期诊断上 有价值，在慢性肝病的预后判断上也有意义。因此， 选择一种灵敏度高、特异性及重复性好的测定方法

对肝纤维化的早期诊断具有重要意义。

ELISA法检测肝纤维化4项血清学指标目前 已被临床广泛采用，但这种检测技术所受的干扰因 素太多，试验结果灵敏性、稳定性差。

本实验采用化学发光法对76例肝穿病人进行 了肝纤维化血清学4项指标的检测,研究结果提示 慢性乙型肝炎患者血清1^八、卩111?、汉.(：水平随肝 纤维化进展逐渐升高，提示对肝纤维化的早期诊断 有一定的意义，这与以往国内外的研究报道一致。 而且检验过程中无交叉污染、报告时间大大缩短、检 验结果灵敏性高、稳定性高。

德国Lumino准自动化学发光系统采用了目前 世界领域内最先进的非酶的小分子有机化合物标记 技术和最先进的纳米磁性微珠分离技术，在灵敏度、 特异性、稳定性、检测速度等方面，都发生巨大的变 化。在肝纤维化血清学指标检测中的应用，使其检 验结果具有高灵敏性、高稳定性、无交叉污染、报告 时间大大缩短等优点，显示出良好的应用前景。

成都华西华科研究所研发生产无创肝纤维化肝硬化早期检测诊断仪

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