两种方法检测血清肝纤维化标记物结果对比分析与无创肝纤维化肝硬化早期检测诊断方法

【摘要】目的评价化学发光免疫分析法(CLIA)和放射免疫分析法(RIA)检测肝纤维化标记物的结果。方法对121例慢 性乙型肝炎患者进行肝穿刺组织学检查，采用CLIA法和RIA法检测血清肝纤维化标记物。同时选择40例健康人作为对照。

结果经组织学检查，本组发现S〇 33例，Si 27例，S2 16例，S3 20例，S₄ 25例；CLIA法检测S₄期患者HA、N、PIIINP和CIV分 别为 504.8±218.5n_ l、323.3±211.9ngfn 丨、52.1 ±30.5n_l和 384.7±221.9ngfn I,明显高于对照组的 61.3±22.6 ngfn 丨、59.0土 18.1ng/fnl、6.9 ± 2.1n_l和 57.5± 11.2ngfnl (P<0.01) ;IA 法检测 S2 期患者血清 PillNP 为 180.8±96.1n_l, S4 期为 238.4土 130.4ngfn I 显著高于 CLIA 法检测的 20.6±14.8n_ 丨和 52.1±30.5ngfn (<0.01 ;IA 法检测的 S4 期患者 CV为 287.4±176.3ngfn I,

显著低于CLIA法检测的384.7±221.如的l(K0.01)。结论CLIA法检测优于RIA法,应取代后者而用于肝纤维化的诊断检测。

【关键词】慢性乙型肝炎;血清肝纤维化指标;化学发光免疫分析法;放射免疫分析法 doi:10.3969/j.issn.1672-5069.2013.04.025

检测血清肝纤维化标志物有助于对肝病活动度的判 断^[1],但血清检测结果往往受到方法学和各种因素的影响。

既往应用的放射免疫分析法（Radioimmunoassay, IA)由于 放射性同位素具有辐射性而逐渐被高灵敏的化学发光分 析法（Chemiluminescence anaysis,CLIA)所代替。与 RIA 比，CLIA具有无辐射污染和可实现全自动化检测等优点。

我们分别采用R IA和C LIA法对121例慢性乙型肝炎患 者血清肝纤维化指标进行了检测，现将结果分析、报道 如下。

材料与方法

―、研究对象选择我科2012年7月~2012年12月期 间住院的慢性乙型肝炎患者121例，男84例，女37例，年龄 13~69岁，平均年龄45.8岁。符合2005年中华医学会肝病学分 会和感染病学分会修订的慢性乙型肝炎防治指南的诊断标准 ^2]。另选同期健康体检者40例,男女各20例，平均年龄46岁。

表1两种方法检测血清肝纤维化标记物(x±s, ng/fn〕比较

CLIA R IA

二、 血清肝纤维化指标的检测分别采用CLIA法(郑州 安图绿科生物工程有限公司）和RIA法（上海海研医学研究 所生物技术中心)检测。

三、 肝穿刺活检采用18G肝穿刺针和美国BARD自 动活检枪，用40g/L甲醛液固定标本，石蜡包埋，连续切片， HE染色。按照《慢性乙型肝炎防治指南》的标准将慢性肝炎 肝组织纤维化程度分为5期（S0—S)。

四、 统计学处理采用SPSS11.5软件进行分析。计量资 料以x±s表示,采用两个独立样本的t检验，组间率的比较采 用x²检验,7X0.05为差异有统计学意义。

结果

两种方法检测血清肝纤维化标记物的结果比较见表1。 经CLIA和R IA两种方法检测的121例慢性乙型肝炎患者 血清HA、LN、PCIII/ PIIINP和CV含量均较对照组明显升高 (K0.01)。

组别	例数	HA	LN	PIIINP	CV	HA	LN	PIIINP	CV
对照组	40	61.3 ±22.6	59.0 ±18.1	6.9 ±2.1	57.5±11.2	52.1±25.3	44.9 ± 22.6	54.6 ±19.9	44.7±18.8
S0	33	75.3 ± 27.1	65.8 ±30.6	8.3 ±2.8	55.9 ±14.4	80.6 ±36.5	51.5±31.4	69.8 ±25.5	56.5 ± 23.3
S1	27	118.6 ±77.2①	109.8 ±65.2①	13.4 ±9.2	99.1±46.6	131.3 ±88.0①	90.8 ±44.6	115.2 ±70.8	105.5 ±42.8
S2	16	296.4 ±100.7②	164.6 ±107.1①	20.6 ±14.8①	168.0 ±119.3①	253.1 ±112.4② 133.4 ±98.6①		180.8 ±96.1①	167.9 ±108.0①
S3	20	361.9 ±144.0②	218.5 ±160.3①	33.9 ±25.0①	247.1 ± 156.2② 375.0 ± 175.6② 238.1 ± 187.3①			266.5 ±139.0② 198.2 ±122.1①
S4	25	504.8 ±218.5②	323.3±211.9②	52.1 ± 30.5②	384.7 ±221.9② 485.3 ±224.3② 325.0 ±244.6②			238.4 ±130.4② 287.4 ±176.3①

S1—S4与S。期比较，①P<0.05,②P<0.01,CLIA检测的结果与RIA比较,P>0.05

讨论

研究表明，血清HA、LN、PCIII / PIIINP和CIV水平的变

化与肝纤维化的活动水平及程度密切相关，对肝纤维化的诊 断有重要意义，但单项测定这些指标有时并不可靠³~^5]。HA反 映肝纤维化活动及肝损伤;PCIII/ PIIINP反映胶原合成的情 况;CV反映胶原降解程度;LN反映基底膜的变化，与门脉高 压有一定的关系。这些指标分别从不同角度反映肝纤维化的 变化。因此,联合检测血清HA、N、PCIII / PIIINP和C V水 平可明显提高肝纤维化诊断的准确性和可靠性⁶~^8]。

肝硬化早期以I型胶原合成增加为主，细胞合成胶原时 以前胶原形式分泌到细胞外。PIIINP是丨丨丨型前胶原(PCIII) 经氨基内切酶作用脱下的多肽，PIIINP的含量可以反映I 型胶原的代谢。近年研究表明，血清PINP是反映早期肝 纤维化程度和活动性的良好指标⁹~^12]。

本文采用CLIA和R IA法同时测定临床病人血清肝纤 维化标记物，显示两种方法在检测肝纤维化血清标志物上均 能取得较好的效果。但CLIA法较RIA法有其特有的优势, RIA法是利用放射性核素标记抗原或抗体，然后与被测的抗 体或抗原结合，形成抗原抗体复合物。RIA多为手工操作，反 应时间长，所用试剂对操作人员及周围环境有_定程度的污 染。CLIA法消除了同位素的污染，大大提高了试剂的稳定 性，检测结果可靠。同时样本无需提前预处理,缩短了分析时 间 ¹¹³~^15]。

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