肝纤维化检验诊断进展与评价与无创肝纤维化肝硬化早期检测诊断方法

成都华西华科研究所研究肝脏损伤能刺激肝细胞再生和/或肝纤 维化。肝纤维化是造成肝功能异常和影响慢 性肝病预后的重要因素之一，亦是慢性肝病 发展到肝硬化必经阶段，现认为肝纤维化尚 有逆转至正常可能，而肝硬化则否。世畀著名 已故肝病专家Hans Popper认为谁能阻止或 减慢肝纤维化的发生，将会治兪大多数慢性 肝病患者。因此及时作出肝纤维化的诊断甚 为重要，其诊断主要依靠肝活检和'检验诊断， 由于前者具有创伤性，穿剌部位的局限性， 以及难以进行动态观察及考核疗效的研究， 因此需荽寻找一个无创伤性、筒单易行4能 反映整个肝脏不受其他全身状况影响的检验 诊断方法。此已引起国内外学者的重视，并有 较多进展，现作扼要介绍》供参考。

一、参与胶原代谢有关酶的检测

在胶原a-肚链合成后，经羟化酶、糖 基转移酶、氧化酶等参与的一系列生化反 应，形成不溶性胶原。胶原经胶原酶与肽酶 怍用而分解〇这呰酶的活性随胶原合成与分 解速度的增加而升高，但胶原合成与分解是 一个动态过程，在肝病初期若合成与分解速 度相近时，肝胶原无明显沉积，当进入中、 晚期时，合成大于分解，则有胶原明显沉积 而致肝纤维化。

(一）羟化海 Pa^rlicka氏等（1987>

测定慢性乙醇中毒鼠与人的肝组织1血清 脯氨酖羟化酶的活性，结果显示（1)鼠肝 和血清中该酶活性均随病程进展明显升高， 最高达2.13倍,（2)慢性无症状乙醇肝损伤 患者肝与血清酶活性较对照组平均增加分别 为1.81倍和2.63倍，与血清胆红质、转氣辞 和碱性瞵酸酶比较，以血清顧氨酰羟化酶增 高幅度最大_f( 3)鼠和人的肝与血清酶活性 升髙水平大体一致，作者认为此测定对某些 患者发展为肝硬化趋势的诊断与判断预后是 有用的，临床评价尚需进一步研究。

(二〉糖基转移酶与氧化辞测定肝与 血清中半乳糖羟赖氨酸转移酶琴赖氨酸氧化 酶的活性已有报道。沿用已久&MAO可能 不是单一的，而是一群作用于不同单胺类化 合物的酶，赖氨酸氧化酶就是其中之一。现 有资料揭示这些酶活性的检测对肝纤维化早 期诊断的敏感性均较差，MAO同功酶仅可 提髙诊断的恃异性，

(三）胶原酶和肽酶肝中胶原酶活性 能较好地反映肝内胶原的分解代谢，现认为 血液中存在有千扰胶原酶测定的物质，使其 应用受到限制。国内已有应用此_研究胶原 的分解及抗肝纤维化治疗的疗效考g。有报 道P-Z肽酶活性能反映肝纤维化恢复，

二，胶原与胶原代谢钧旳挣躅

 (一）       脯氨酸、羟脯氨酸（Hyp)及羟 脯氨酸肽的测定，苁血淸含量与肝纤维化的 关系各家报道不-，多数报道在慢活肝及肝 炎后肝硬化仅轻度增高。血淸中Hyp有3部 分，仅有低分子部分与胶原代谢有关。测定 肝中的Hyp的含量，可作为肝纤维化程度的 指标，已普遍应用于实验与临床肝纤维化的 研究。测定尿中Hyp的含量，可以反映体内 胶原的分解代谢状况。

(二）         各型胶原与前胶原的检测

1.      肝脏1、皿、前1!、汉、又和\1型胶原 的定性和定蛩研究已有报道。早期肝硬化IV 型胶原量占总胶原量的3.1土 1,3%，而进行 性肝硬化仅为〇.9± 0.3?.“鼠感染曼氏血 吸虫后第8周，是肝虫卵肉芽肿反应髙峰之 肘，亦是胶原合成最多之际> 但1、111、前m 和IV型胶原在肝脏沉积量以第20周为最多。

IV型胶原沉积量在第10周高于第8、12周， 与第16周相似，但占总胶原的百分比值仍似 第10周为最髙.说明IV型胶原占总胶原的比 值对早期肝硬化有提示怍用。

2.      血清IV型胶原的7S成分（7S胶原） 及II[和IV前胶原肽的测定已有报道》尤以II 型前胶原肽（piep)报道为多，piep含置 升髙反映瓜型胶原合成旺盛。近李全谟等研 究，认为血清PI0P与门脉区、桥连叵纤维 母细胞数目及纤维化程度无统计学上的相 关，似乎较能反映肝脏的炎症与坏死，而不 反映肝纤维化程度。从血吸虫病肝纤维化动 物实验系统的观察研究中，已清楚显示胶原 合成速度与胶原的沉积不完全相关，仅有肝 胶原沉积量与肝纤维化程度有关，这些资料 有助于我们正确理解血清PIGP的临床意 义。晚近研究认为7S胶原不仅与肝坏死程度 和细胞浸润有关，且与肝小叶内纤维化程度 密切相关。

3.      测定血液中I和IE型胶原特异性体 液（抗体）和细胞免疫反应（例如白细胞移 动抑制试验）已有报道,U为后者较前者与 肝纤维化更为密切，

三，a质#关指标的检測

(―)N-乙酰-0-D氨基葡萄糖苷酶 (NAG) NAG是一种溶酶体酶，在结缔组 织分解中起重要作用。在肝纤维化患者中， 血淸NAG与胶原分解有关。NAG分子量为 13〜14万，不易滤过肾小球随尿排出，用纯 nag注人小鼠后发现被肝脏迅速清除，故 认龙血液中的NAG与尿中NAG无关> 我们 测定无肝病的慢性肾炎尿毒症患者尿NAG 明显增髙，而血清NAG正常。肾损害时尿 中出现的NAG可能是一个新的同功主 要存在于肾近曲细管上皮细胞溶酶体中，该 部位受损可引起尿NAG升髙。国内外NAG 临床研究结果》多认为在急性肝炎不如转氨 酶敏感》迁肝患者正常，血吸虫病肝纤维化 与肝炎后肝硬化者轻、中度增高；而慢活肝 多明显增高》还伴有血清PBIP明显升髙， 提示慢活肝患者胶原合成与分解代谢均活 跃，

(二）纤维连结蛋白〈Fibrcmectin， Fn)血清F_n的测定国内已有较多报道，用 单扩法、血凝法和火箭电泳法测定，结果显 示对肝纤维化诊断不是一个良好指标。国外 采用ELISA和RIA法测定Fn,国内已建立 EUSA法测定F_n。国外报道急、慢性肝炎 患者中，血浆Fn水平升高，反映纤维组织 增生与结缔k织代谢增加。早期肝硬化患者 血浆Fn浓度明显上升，失代偿期肝炎后肝 砚化较低，尤以伴有腹水者更为明显。Fn 降低的原因可能因Fn与纤维蛋白及胶原紧 密结合，使大量血浆Fii沉积于肝纤维组织 中I亦有认为肝病时Fn下降与肝细胞产生 戚少有关，因此Fn似可怍为判断肝功能与 肝病预后的指标。另有认为Fa水平反映单 核巨噬细胞系统的功能状态^肝功能严重受 损时可造成机体免疫功能下降，亦可降 低。Fn能否怍为肝纤维化早期沴断可信指 标》尚待临床累积更多的资料。

〈三）层粘连蛋白（Laminin，LM)

悬甚底暌枘主要成分，多与IV型胶原伴陬

在，已有报道血淸LM水平与肝纤维程啶有 关，近有人认为血清LM的PI片段的水乎与 7S胶原临庞意义相同，两者对肝纤维化的 诊断与治疗效果的判断均有一定价値_r曰本 报道急、慢性肝炎、酒精性肝病和肝癌者 LM明显高于正常人，但这些肝病之间无明 显差异，在急性肝炎、肝硬化者LM与血淸 PUP,以及在酒精性肝病与NAG、Y-GT 密W相关。另有报道■肝静脉与前臂静脉血淸 LM与门脉茁密切相关，认为是门脉高 压诊断有用的生化指标。在鼠曼氏血吸虫病 肝、肠组织中沉积情况大致与Fn相似。

四、其他核璐共振成像术诊断肝纤维 化的研究已有一些报道，曾认为肝质子自 旋-晶格弛豫时间（1)的增加可作为肝纤维 化的指示者，但近来实验性胩纤维化系统观 察不支持这一结论，且认为肝的1\增加不是 非侵袭性发展为肝纤维化可信指标。Pand- uro氏等报道CC1,诱发肝纤维化全过锃中， 盱内胶原基因转录明显增加，此测定可能有 助于肝纤维化的诊断。另国内学者研究认为

血清的腺苷脱氨酶活性、微球蛋白和甘 胆酸含量与肝纤维丨1：程度有关，肝超声显像 也有助于肝纤维化的诊断d

肝病患者在进行上述检验时，分析其结 果的临宋意义时，需排除其他胶原性疾病、 肿瘤等疾病，还要考虑到肝内胶原的合成、 分解与沉积的动态变化的关系。至今尚无理 想的肝纤维化早期诊断血清学指标，近年国 外学者致力于胶原、Fri和LM受体与基因的 研究，期望能从中研究出新的肝纤维ft血清 学诊断方法。

肝癌血清标志物诊断的研究进展

启糸肝癌防治研究所陆士中

(―)甲眙蛋白（afp>变异体肝癌 血清学诊断中仍首推AFP,但其尚未到达它 的顶峰。AFP单克隆抗体的应用以及AFP 变种的发现进一步提髙了 AFP的价值_。

I. LCA结合性AFP亚型。武田等首 先发现胚胎AFP和肝癌AFP的免疫性虽未 见差异，但其糖链结构可有所不同，这可根 据AFF对刀豆凝集素（ConA)和小齒豆凝 集素（LCA)亲合性的差异进行分类₃小 朴等通过植物血凝素的交叉吸附电泳法，用 LCA和ConA研究了 AFP亚增，发现10例 肝细胞癌<HCO和4例肝硬化（LC)或 慢性肝炎的AFF均咭C_〇nA结合，fE只-奸 HCC的AFP与LCA结合₀许凯黎等采用单

克隆AFP抗体放射免疫测定及LCA亲和双 向放射免疫电泳对59例原发性肝癌CPLC)

和40例非癌性肝疾患作AFP定量测定及分 子变异体比例分析。结果表明_；AFP总量 测定难于鉴别肝癌与非肝癌，而AFP变异' 体的比例分折，59例肝癌的LCA结合型 AFP的百分率<52.3±19.0%>显著高于 40例良性肝病 <10.5±4.5%, PC0.001X 袁爱力等采用LCA亲和双向放射免疫电泳 对80例PLC、39例良性肝病的AFP变异体 进行了趼究_f PLC的LCA结合型AFP比率 (44.1±15.3%)显著髙干良性肝病<21.7± 12.3%，p<0.01)。上述结果表明，LCA结 合性AFP亚型是比AFP更特异的肝瘅标志

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